探讨液氮冷冻法制备家兔股骨头坏死

时间:2019-09-09 10:04来源:未知 作者:ydgmve2020yyx 点击:
探讨液氮冷冻法制备家兔股骨头坏死 MVE液氮罐 1材料与方法 1.1实验动物:10只成年新西兰大白兔,雌雄不限,年龄4~5个月,体质量2.5~3.5kg。 1.2实验方法:所用动物的双侧股骨头均参加实
探讨液氮冷冻法制备家兔股骨头坏死  MVE液氮罐

1材料与方法

1.1实验动物:10只成年新西兰大白兔,雌雄不限,年龄4~5个月,体质量2.5~3.5kg。

1.2实验方法:所用动物的双侧股骨头均参加实验,将动物俯卧位固定,取髋关节后侧切口,暴露关节囊并十字切开,内旋股骨,显露股骨头的负重区,在不切断股骨头(圆)韧带,髋关节不造成脱位的基础上,保护周围组织,以液氮棉团连续快速冷冻股骨头8次,共约3min,关闭手术切口。术后肌肉注射庆大霉素,以预防术后感染。

1.3股骨头标本的制作和观察:实验动物在麻醉下,分别于术后3、7d各处死1只,术后2、4、6、8周各处死2只,进行股骨头标本的大体解剖学观察和X线检查。经10%甲醛溶液固定股骨头标本,用8%甲酸溶液脱钙处理,石蜡包埋,组织切片,HE染色后,进行光镜观察和摄像。

2结果

2.1股骨头标本的大体观察:造模3d的股骨头标本,外形圆而光滑,关节软骨呈苍白色,7d的标本与3d情况无明显区别。2周时,股骨头外形圆滑,有2例标本关节软骨面出现少许剥脱,关节软骨呈苍白色;4周时,有3例股骨头标本关节面出现轻度塌陷,所有关节软骨均有轻度剥脱。6周时,股骨头外形仍呈圆形,关节软骨剥脱加重。8周时,关节软骨呈苍白色,剥脱严重,关节软骨下有骨暴露,并有1例失去其圆形轮廓,呈现骨性关节炎样改变(图1)。

2.2股骨头标本的X线观察:造模3d的股骨头外形圆,骨密度无明显变化,骨小梁结构正常;7d时的标本,X线表现与3d时无明显差别。2周时,股骨头外形圆,骨密度有所增加,骨小梁结构完整。4周时,有3例股骨头轻度变扁,并有骨刺样结构形成,骨密度增加,骨小梁结构出现紊乱(图2)。6周时,股骨头外形圆,骨密度明显增加,骨小梁结构变得紊乱,出现软骨下囊性变。8周时,股骨头标本外形圆,骨密度高,骨小梁结构紊乱,软骨下呈囊性变;有1例股骨头标本,正常外形丧失、变小。

2.3股骨头标本的组织学观察:在造模3d时的股骨头组织切片上,冷冻区和周围部的软骨细胞出现坏死,骨细胞和骨髓组织也呈现坏死,远离冷冻区的骨组织坏死较轻。关节软骨表面光滑,骨小梁结构正常,骨陷窝空虚。7d时的标本和3d时无明显区别。2周时,可见骨髓纤维化,并有骨髓基质细胞,出现于坏死的骨小梁周围(图3)。有2例股骨头标本,关节软骨下有较多的破骨细胞聚集(图4)。关节软骨表面轻度毛糙,部分软骨细胞呈灶性增生,并出现爬行修复现象(图5)。骨小梁结构完整,骨陷窝空虚,骨小梁周围出现附加骨组织(图6),在部分标本的骨小梁间,有新生类骨质形成。4周时,出现骨髓增生,骨组织修复比2周时更加活跃,骨小梁和新生类骨质较2周时更为增多。关节软骨表面毛糙,部分出现剥脱。有少数的骨小梁变细或出现折痕,骨陷窝空虚;有3例股骨头标本,软骨下骨组织修复旺盛,软骨下的骨小梁变细、形态不规则或出现折痕(图7),甚至出现股骨头关节面的塌陷(图8)。6周时,骨组织修复继续进行,部分软骨剥脱,软骨下出现骨暴露。骨小梁变细,出现折痕或吸收现象;骨陷窝空虚,骨小梁附加骨和新生类骨质较多。8周时,关节软骨剥脱严重,骨小梁紊乱,骨陷窝空虚,出现大量的骨小梁附加骨和新生类骨质。MVE液氮罐
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